Search Knowledge Base

» Unlabelled » IDENTIFIKASI TANIN DARI DAUN SIRIH HIJAU (Piper betle L)

Minggu, 15 Juli 2018

IDENTIFIKASI TANIN DARI DAUN SIRIH HIJAU (Piper betle L)

di Juli 15, 2018
Share this

LAPORAN PRAKTIKUM FITOKIMIA
PERCOBAAN KE 2 (DUA)
IDENTIFIKASI TANIN DARI DAUN SIRIH HIJAU
 (Piper betle L)













Nama                                      : Nurani Puji Pangestuti
NIM                                        : 1606067040
Kelompok                               : A6
Hari, Tanggal Praktikum        : Senin, 2 Juli 2018
Dosen Pembimbing                : Dian Ratna Rianti, M.Sc., Apt





LABORATORIUM FITOKIMIA
AKADEMI FARMASI INDONESIA YOGYAKARTA
2018



PERCOBAAN 2
IDENTIFIKASI TANIN DARI DAUN SIRIH HIJAU (Piper betle L)
A.    TUJUAN
Mahasiswa dapat memahami dan dapat melaukan identifikasi tanin dari daun sirih hijau berikut analisis kualitatif golongan senyawa dengan Kromatografi Lapis Tipis

B.    DASAR TEORI
Infundasi adalah penyarian yang umumnya untuk menyari kandunga  aktif yang ada pada sedian tanaman yang larut dalam air. Penyarian adalah peristiwa memindahkan massa zat aktif yang semula berada didalam sel ditarik oleh cairan penyari sehigga zat aktif larut dalam cairan penyari (Anonim, 1986). Sistem yang digunakan dalam ekstraksi harus dipilih berdasarkan kemampuannya digunakan dalam melarutkan jumlah maksimal zat aktif dan seminimal mungkin zar yang tidak digunakan (Ansel, 1989). Farmakope Indonesia menetapkkan untuk proses penyarian sebagai cairan penyari digunakan air, etanol-air, eter. Peyarian pada pembuatan obat di Indonesia masih terbatas pada penggunaan cairan penyari air, etanol atau etanol air (Anonim, 1979).
Infusa adalah sediaan cair yang dibuat dengan menyari simplisia dengan air yang pada suhu 90oC selama 15 menit. Penyarian tersebut akan menghasilkan sari yang tidak stabil dan mudah tercemar oleh kuman dan kapang, sari yang diperoleh  tidak boleh disimpan lebih dari 24 jam. Infusa dibuat dengan membasahi bahan bakunya, biasanya dengan ai dua kali bobot bahannya. Penyariannya dilakukan pada saat cairan masih panas dengan kain flanel, kecuali dinyatakan lain yang mudah menguap (Anonim, 1986).



Klasifikasi
Kingdom : Plantae
Divisi : Magnoliphyta
Kelas : Magnolipsida
Ordo : Piperales
Keluarga : Piperaceae
Genus : Piper
Spesies : Piper betle L.                                  (Dwivedi dan Tripathi, 2014).

Daun sirih hijau mengandung minyak atsiri sebesar 1-4,2% minyak atsiri, tanin (Hariana, 2013). Terdapat pula kandungan alkaloid, flavonoid, fenol dan steroid (Srisadono, 2008). Kandungan lain yang terdapat dalam sirih hijau yaitu: 1-alanine, β-alanine,α-amino butyric acid, 1-arginine, asparagine,1-asam aspartat, 1-asam glutamat, glisin, histidin, 1-leusin, 1-lisin, 1-metionin, fenilalanin,1-prolin, 1-serin, 1-teronin, 1-triptopan, 1-rirosin, 1-valin, α-alanin, sistin, asam oksalat, nhentriakontan, n-pentatriakontan, sitosterol, terpen, fenil propane, saponin dan vitamin C.

C.    ALAT DAN BAHAN
Alat
1.     Seperangkat alat infus
2.     Seperangkat alat KLT
Bahan
1.     Daun sirih hijau segar
2.     Aquadest
3.     N- Butanol
4.     Asam Asetat
5.     Plat silica gel GF 254
6.     Pembanding Asam Tanat

D.    CARA KERJA

E.     HASIL

Nama Simplisia          : Daun Sirih Hijau (Piper betle L)
Metode ekstraksi        : Infundasi
Randemen ekstrak      :
            Berat awal simplisia   : 40 gram
            Jumlah Pelarut                        : 240 ml
            Berat Ekstrak              : 210 ml
Randemen Ekstrak                 : -

Pemerian ekstrak        :
            Aroma             : Bau khas sirih hijau
            Warna                         : Jernih Kuning
            Bentuk            : Cair

Hasil skrining Fitokimia

            Filtrat hasil ekstraksi + pereaksi FeCl3  ----> Hijau kehitaman
            ( hasil posistiv mengandung tanin )

Hasil pengamatan Kromatografi Lapis Tipis
            Fase diam       : Silika Gel Gf 254
            Fase gerak       : n butanol : Asam Asetat : Air ( 5 : 4 : 1)
Deteksi UV     : 254 dan atau 366
Pembanding    : Asam Tanat













                        Rf cuplikan standar    : 6,8 / 8            = 0,85
                        Rf sampel                   : 7,3/8               = 0,9125
Hasil
Infusa









 



















Hasil Uji Pereaksi FeCl3




















       


     Hasil Kromatografi Lapis Tipis
 











F.     PEMBAHASAN
Pada praktikum yang telah dilakukan adalah identifikasi tanin dari daun sirih hijau (Piper betle L). Tujuan praktikum kali ini yaitu mahasiswa dapat memahami dan melakukan identifikasi tanin dari daun sirih hijau berikut analisis kualitatif golongan senyawa tersebut dengan metode Kromatografi Lapis Tipis. Metode ekstraksi yang digunakan adalah metode infundasi. Infundasi yaitu penyarian untuk kandungan zat aktif yang larut dalam air dari bahan bahan nabati. Infusa adalah sediaan cair yang dibuat dengan menyari simplisia dengan air yang pada suhu 90oC selama 15 menit. Pada proses infundasi yang telah dilakukan digunakan daun sirih hijau sebagai sampel. Pemilihan metode tersebut dikarenakan daun sirih hijau mempunyai srruktur jaringan yang lunak dan zat aktifnya berada diluar jaringan. Infusa dibuat dengan membasahi bahan bakunya, biasanya dengan iar duankali bobob bahznnya. Penyaringan dilakukan pada saat cairan musih panas dengan flanel, kecuali yang mudah menguap (Anonim, 1986).
            Sebelum dilakukan proses ekstraksi dengan metode infundasi terlebih dahulu daun sirih dicuci atau dibersihkan terlebih dahaulu untuk mengindari zat pengotor. Kemudian daun dipotong kecil-kecil tujusnnys untuk memperkecil ukurab pariktel sehingga luas permukaan lenih besar dan zat aktif yang tersari lebih banyak karena kontak dengan cairan penyari lebih besar. Daun yaang telah dipotong dimasukan dalam panci A yaitu panci yang kecil ditambah dengan cairan penyari dengan air. Penggunaan air dengan pelarut sesuai dengan literature dimana infundasi dilakukan pemyarian dengan menyari kandungan zat aktif yang larut dalam air. Panci B berisi sir dimana ukuran lebih besar. Panci A dimasukan kedalam panci B yang telah berisi air tersebut terhitung suhu yang berada dalam panci A mencapai 90oC pemanasan dilakukan di atas kompor listrik . Setelah sampai dengan suhu 90oC yang diukur menggunakan termometer waktu pemyarian dimulai selama 15 menit. Saat setelah 15 menit infus didinginkan terlebih dahulu. Infus diserkai saat dingin untuk menghindari penguapan yang berlebihan dimana infus Piper betle mengandung minyak atsiri yang tinggi. Setelah dingin diserkai atau di disaring dengan kertas sarung dan didapat kan volume infus yaitu sebesar 210 ml. Randemen ekstrak tidak dapat dihitung karena infus tidak dsimpan terlebih dahulu dalam lemari es selama 1 minggu (hingga terbentuk krsital amorf berwarna putih kekuningan) yang nantinya kristal yang diperoleh dari penyaringan tersebut dicuci dan dengan 10 ml air es. Mengeringkan kertas saring bersama endapan pada suhu 50oC sampai kering kemudian ditimbang untuk memperoleh randemen dari ekstrak tersebut.
            Selanjutnya dilakukan skrining fitokimia terhadap infusa sampel tersebut. Tujuan skrining fitokimia pada sediaan untk mengetahui senyawa goongan yang dituju terdapat dalam infusa Piper betle tersebut. pengujian dilakukan dengan penambahan pereaksi FeCl3 pada sediaan infusa hasil positif ditunjuka  dengan terbentuknya perubahan warna menjadi hijau kehitaman pada infus, karena terbentuknya Fe3+ tanin dan Fe3+  polifenol. Atom oksigen pada tanin dan polifenol mempunyai pasangan elektron yang mendonorkan elektronnya pada Fe3+ yang mempunyai orbital kosong membentuk ikatan kovalen koordinat seingga menjadi suatu ikatan yang komplek atau senyawa yang komplek.
            Proses selanjutnya yaitu identifikasi sediaan infus dengan metode kromatografi lapis tipis. KLT merupakan metode yang didasarkan pada prinsip absorbsi. KLT dilakukan untuk uji kualitatif berdasarkan nilai Rf sampel dan nilai Rf cuplikan standar. Prinsip dari KLT yaitu pemisahan didasarkan pada perbedaan distribusi senyawa fase diam dan fase gerak. Senyawa yang terikat kuat oleh fase diam akan tertahan dan terelusi lebih lama dibandingkan dengan senyawa yang terikat lemah akan lenih mudah terbawa oleh fase gerak dan terelusi pada plat. Daya ikatan antara senyawa dan dua fase didasari pada sifat polaritasnya. Digunakan fase diam Silica gel (GF = Gypsum berflourosesensi pada panjang gelombang 254). Fase gerak yang digunakan yaitu BAW atau campuran n-Butanol : Asam Asetat : Air yaitu 5 : 1 : 4. Terlebih dahulu ketiga campuran larutan tersebut dimasukan kedalam corong pisah kocok atau goyangkan perlahan hingga terjadi pemisahan dua lapisan. Digunakan lapisan atas sebagai fase gerak dan lapisan bawah dibuang atau tidak dipergunakan. Pemisahan terjadi karena perbedaan kepolaran dan masa jenis campuran pada fase gerak tersebut. Tujuan perlakuan tersebut yaitu untuk meningkatkan kepolaran fase gerak. Eluen campuran (BAW) n butanol : Asam Asetat : Air, memberikan pemisahan yang baik dibandingkan perlarut lain, karena dari komposisinya, eluen tersebut bersifat sangan polar. Kepolaran fase diam dan fase gerka hampir sama, tetapi masih lebih polar fase gerak sehungga senyawa tanin yang dipisahkan terangkat mengikuti aliran eluen, karena tanin bersifat polar (Hayati, dkk, 2010). Sebelum dilakukan pentotolan terhadap sampel dan cuplikan standar dilakukan pengembangan yaitu pita kertas saring dimasukan dalam suatu chumber atau bejana yang telah berisi eluen. Tujuan atau fungsi pengembangan yaitu untuk mengetahui  chumber telah penbuh dengan gas eluen, untuk proses partisi senyawa. Setelah dilakukan pengembangan, dilakukan proses KLT dengan menotolkan pada garis yang telah dibuat 1cm dari atas dan bawah pelat, totolan dilakukan pada salah satu sisi pelat sebaris antara sampel dengan cuplikan standar dengan psoisi yang berbeda pada silika gel, dimasukan dalam chumber dengan posisi sedkit tegak lurus kemudian segera ditutup. Setalah pengembangan plat silika gel diambil dari dalam chumber kemudian di amati dibawah sinar UV 366 nm yang telah disemprot dengan FeCl3 untuk penegasan bercak noda yang timbul oada plat silika gel, tanin terhidrolisi menampakan bercak berwarna hijau kehitaman dan pada tanin terkondensasi menampakan bercak berwarna hijau kecoklatan hal ini karena terbentuknya komplek logam Fe dengan senyawa fenol (Bruneton, 1999). Diperoleh dari hasil pengamatan Rf cuplikan standar sebesar 0,85 dan Rf sampel sebesar 0,9125. Dari hasil tersebut daun sirih positif mengandung tanin. Perbedaan nilai Rf ini disebabkan karena beberapa faktor , seperti :
1.     Jenis dan mutu silika gel serta daya serap dan kelembabannya
2.     Susunan pelarut mengenai kemurnian dan stabilitas campuran pelarut selama pemakaian dan penyimpanan.
3.     Temperatur ruang
4.     Kelembaban ruang
5.     Kejenuhan ruang akan uap pelarut dalam chumber
6.     Cairan infus tercemar mikroba sehingga menyebabkan zat zat aktif didalamnya berkurang.

G.    KESIMPULAN
Mahasisa dapat memahami dan melakukan identifikasi tanin dari daun sirih hijau serta analisis kualitatif golongan senyawa tersebut dengan metode Krmatografi Lapis Tipis yaitu penyarian senyawa aktif dengan metode infundasi, yaitu sediaan cair infusa yang dibuat dengan megekstraksi simplisia nabati dengan air pada suhu 90oC selama 15 menit. Identifikasi dilakukan dengan skrining fitokimia menggunakan pereaksi FeCl3 dengan hasil positif yaitu diperoleh warna hijau kehitaman dan identifikasi dengan menggunakan Kromatigrafi lapis tipis diperoleh Rf sampel sebesar 0,9125 dan Rf cuplikan standar 0,85.








DAFTAR PUSTAKA

Ahadi, N.A., 2013. Theobromine and Remediation of Cocoa by Product : on overview. J.Biol.Sci.
Anonim, 1979. Farmakope Indonesia Edisi III. Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Jakarta.
Anonim, 1980. Materia Medika Indonesia. Departemen Kesehatan Republik. Indonesia. Jakarta.
Anonim, 1986. Sediaan Galenik. Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Jakarta.
Ansel, H.C., 1989. Pengantar Bentuk Sediaan Farmasi. University Indonesia Press. Jakarta.
Bruneton, J., 1999. Alkaloids: In H.K Caroline : Pharmacnosy: phytochemistry and medical plants: 2nd ed. Paris. Lavoisier Publishing.



1 komentar :

Langganan: Posting Komentar ( Atom )

Popular Posts

Follow us